API 芽孢杆菌或乳杆菌鉴定试剂条 50300品牌：API法国

　　

　　概要说明

　　API 50 CH 是一个标准化的鉴定系统,它采用 50 个生化试验用来对微生物的碳水化合物的代谢进行研究. API 50 CH与 API 50 CHL 培养基配合使用,用以鉴定乳酸杆菌和相关细菌,与 API 50 CHB 培养基配合使用,用以鉴定芽孢杆菌及相关细菌,肠杆菌科细菌和弧菌科细菌.该系统能够鉴定的全部细菌列在相应的表格中.

　　原理

　　API 50 CH 试条由 50 个微量孔组成,用以研究碳水化合物及其衍生物(heterosides,多元醇,糖醛酸)底物的发酵.用 API 59 CHL 或 API 50 CHB 培养基接种试条,使底物水解,然后检测发酵试验。试条孵育过程中,试条上的小管内在厌氧环境下产酸,PH改变而使培养基中指示剂颜色变化,由此可观察到发酵作用。试条上*孔中不含任何活性成分,以此作为阴性控制。

　　注:API 50 CH 试条可用来检测两条途径

　　- 氧化作用 细菌通过需氧产酸,使试条孔中 PH 指示剂颜色改变。

　　- 同化作用 当细菌可利用底物中的不同物质为*碳源时,试条上的孔中即可显示明显的细菌生长。

　　此时应根据所测试细菌的代谢和营养要求选择培养基接种试条(见参考文献)。

　　试条组成 (每盒含 10 个测试 ) :

　　- 10 个API 50 H 试条

　　- 10 个接种盒

　　- 10 张结果记录单

　　- 1 份说明书

　　试条成分

　　API 50 CH 试条的成分列于下表中.

　　

　　

　　

　　可根据所使用的不同底物来调整上述各成分的含量。

　　必须但未提供的试剂和材料

　　试剂 :

　　- 接种培养基

　　API 50 CHL 培养基(产品号.50410)

　　API 50 CHB/E 培养基(产品号.50430)

　　(指本说明书中提到的培养基或其他适合的培养基)

　　- 矿物油 (产品号. 70 100)

　　- McFarland 标准比浊管 (产品号. 70 900),或

　　DENSIMAT 比浊仪(产品号.99234),或

　　ATB Densitometer

　　- 鉴定软件(请与生物梅里埃公司联系)

　　材料:

　　- 移液管或聚苯乙烯滴管

　　- 安瓶架

　　- 安瓶保护套

　　- 棉试子

　　- 微生物实验室常规设备

　　警告和注意事项

　　只适用于体外诊断和微生物的控制

　　只适用于专业人员使用

　　此试剂盒中含有动物源性成分。已知所使用原始材料和动物的卫生状况不能完全保证其不含的物质,因此我们建议所有样品应被视为具有,并应按通常的安全措施对其进行正确处理。(勿吸入或咽下)

　　所有标本,细菌培养物,接种物应被视为 具有并应进行正确处理。在整个试验过程中,要遵守无菌技术要求和通常使用的防范措施。可参照 NCCLS M29-A 中《保护试验室工作人员免受仪器生物公害和通过血液、体液、组织传染的的侵害》的内容,以及 1997 年 12月核准通过的指导方针。另外的防护措施,可参照《微生物和生物医学实验室的生物研究安全》HHS 出版,No.(CDC) 93-8395,1993 年 5 月第三版。或参照各国正在使用的规章执行。

　　不要使用过期的试剂

　　在使用前要检查包装和部件是否完整

　　不要使用损坏的试条,如杯变形,干燥剂袋开口等。

　　所提供的操作数据是通过使用本说明书*的步骤获得的,对步骤的任何改变都可能会影响结果。

　　试验结果的解释应考虑到的病史、标本的来源、菌落及菌体的形态学特点,如果需要的话,可参考任何需要的附加实验结果,特别是抗生素敏感试验的结果。

　　储存条件

　　试条应在 2-8°C 储存,并于包装盒上指示的有效期前使用。

　　标本(收集和准备)

　　API 50 CH 试条不能直接用于或是其它标本。

　　被鉴定的微生物,必须首先根据标准的微生物技术在适当的培养基上进行分离。

　　使用说明

　　使用前请仔细阅读相关说明书,根据需要选择 API 50 CHL或 API 50 CHB/E 培养基。

　　试条的准备

　　每条试条分别由 5 个小试条组成,每个小试条上有 10 个小管。

　　准备孵育盒(包括底盘和盖子)

　　在盒子底盘一端的加长部分记录菌株的编号(不要记录在盖子上,因为操作过程中很容易将盖子错放到其他试条上)

　　加 10ml 蒸馏水或去离子水(或其他水,但不要含有可释放气体的成分,如*,二氧化碳气等)于孵育盒底盘中,使其填满所有的孔,以保持湿润的气体环境。

　　从包装袋中取出 2 个试条(0-19,20-39),再把它们分为 4 个小试条(0-9,10-19,20-29,30-39)并全部放在孵育盒底盘中。取出另一个小试条(40-49)放在孵育盒底盘中上述 4 个试条的后面,即完成试条的准备。

　　接种物的制备

　　在适当的培养基上接种细菌使其生长。

　　确认菌株为纯培养物。

　　使用棉试子从固体培养基上收集菌株,如从液体培养基中收集菌株,则需离心。

　　在适当的培养基中制备接种物(菌悬液)(参照 API 50CHL 或 API 50 MCHB/E 培养基说明书)菌悬液制备好后,应立即使用。

　　接种试条

　　用无菌加样器按下述要求将菌悬液加到试条上的 50 个管中。

　　将孵育盒底盘向前轻轻倾斜。

　　使加样器头靠在杯的边缘加入菌悬液,避免产生气泡。

　　仅加满管的部分,管的上部(杯)不要加菌悬液,这样管内可保持厌氧环境

　　当菌悬液接种完成后,液面应避免出现新月形的凹陷或凸起。

　　根据被检细菌的生长需要,将试条放在适当的温度进行孵育:30°C,37°C 或 55°C。

　　判读和解释

　　试条判读

　　根据细菌和所研究反应的类型,在达到了规定的孵育时间后(如 24 小时,48 小时),阅读试条。

　　解释

　　以阳性(+), 阴性(-),可疑(?)来解释每一个试验,将结果记录在结果记录单上.

　　结果可产生生化反应谱,将其输入到乳酸杆菌和相关细菌,芽孢杆菌和相关细菌,肠杆菌科细菌和弧菌科细菌的鉴定软件中,即可得到鉴定结果.

　　注:该结果可用于其他目的:

　　- 不同型的细菌可用于流行病学的分群.

　　- 对一群细菌的分类学分析.

　　- 对未知类细菌进行分群.